CRM-GTX6 膝溝藻毒素6（NRC標(biāo)準(zhǔn)品）是一種經(jīng)認(rèn)證的校準(zhǔn)溶液，專為膝溝藻毒素6（GTX6）的分析方法開發(fā)和準(zhǔn)確定量而設(shè)計(jì)。該濃度適用于制備用于校準(zhǔn)儀器的稀釋系列，例如通過(guò)柱前/柱后氧化熒光（LC-ox-FLD）或液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）進(jìn)行檢測(cè)的液相色譜，以及用于回收實(shí)驗(yàn)的加標(biāo)對(duì)照樣品。

在打開之前，應(yīng)將每個(gè)安瓿瓶加熱至室溫，并將內(nèi)容物充分混合。安瓿應(yīng)在預(yù)劃線處打開。應(yīng)使用校準(zhǔn)的體積測(cè)定設(shè)備準(zhǔn)確轉(zhuǎn)移等分試樣。如果溶液打開幾分鐘以上，溶劑蒸發(fā)會(huì)導(dǎo)致濃度增加。建議CRM-GTX6 膝溝藻毒素6（NRC標(biāo)準(zhǔn)品）不應(yīng)蒸發(fā)至干，因?yàn)榭赡軙?huì)損失。注意：溶液的體積未經(jīng)認(rèn)證。僅認(rèn)證濃度。因此，安瓿的全部成分不應(yīng)簡(jiǎn)單地轉(zhuǎn)移到容量瓶中并稀釋至體積。

CRM-GTX6 膝溝藻毒素6（NRC標(biāo)準(zhǔn)品）的制備是從鏈狀亞歷山大藻的培養(yǎng)生物質(zhì)中分離出來(lái)的。提取和分離是在新西蘭Cawthron Ilnstitute進(jìn)行的。加拿大國(guó)家研究委員會(huì)（NRC）[4]通過(guò)制備規(guī)模色譜法進(jìn)行了最終純化。GTX6的結(jié)構(gòu)和純度通過(guò)LC-MS/MS[5]（圖1和圖2）和NMR確認(rèn)。使用LC高分辨率MS（LC-HRMS）獲得GTX6的[m+H]*離子的測(cè)量準(zhǔn)確m/z為396.0926（C1oH:N-OsS11為-1.4ppm）。通過(guò)LC ox FLD[6]（圖3）、紫外毛細(xì)管電泳（CE UV）[7]和化學(xué)發(fā)光氮檢測(cè)液相色譜（LC-CLND）[8]進(jìn)一步評(píng)估純度。在CRM-GTX6-b（表2）中存在較低的相對(duì)水平的gonyautoxin-5（GTX5）。還檢測(cè)到微量的gonyautxin-1和-4。

表2：LC-MS分配的CRM-GTX6-b中GTX5的信息值。

儲(chǔ)備溶液通過(guò)在HzO中稀釋純化的GTX6以進(jìn)行定量1H-NMR（qNMR）[9]來(lái)制備。CRM-GTX6-b溶液通過(guò)在用乙酸調(diào)節(jié)至pH6的過(guò)濾（0.2μm）脫氣去離子水中精確稀釋qNMR儲(chǔ)備溶液而制備。等分試樣被分配到清潔的氬氣填充琥珀色玻璃安瓿中，并立即進(jìn)行火焰密封。每個(gè)安瓿含有大約0.5毫升溶液。

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